末端脱氧核苷酸转移酶

末端脱氧核苷酸转移酶Terminal deoxynucleotidyl transferaseTdT、末端转移酶),是一种特殊的DNA聚合酶,显示出未成熟的、"前B","前T淋巴细胞"和"急性淋巴性白血病/淋巴瘤细胞"。"末端转移酶"于"抗体基因重组时"加上N核苷酸(N-nucleotide)至V(D)J外显子上,能够形成连接多样性(Junctional diversity)的现象。在人类中,末端转移酶是由DNTT基因来编码。 [1][2]

TdT不存在于"胎肝造血干细胞"上,而在胎儿期明显的损害B细胞之连接多样性[3]

功能

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"末端转移酶"催化添加核苷酸至DNA分子的3'末端的反应。不像大多数的DNA聚合酶,它不需要一个模板。这种酶的优选底物是3'突出端,但它也可以添加"核苷酸"(nucleotides)至"钝末端"(blunt end)或"凹陷的3'末端"(recessed 3' end)。是一种必要的辅因子,但是在"体外"反应条件下(in vitro)镁(Mg)及锰(Mn)也可以起相同的作用。

使用

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末端转移酶在分子生物学中的应用。它可以被用来在快速扩增cDNA末端(RACE)中来添加"核苷酸"(nucleotide),然后可以用来作为在后续PCR的"引物"(primer)的模板。它也可以用于添加标记放射性同位素的核苷酸,例如在TUNEL检测(末端脱氧核苷酸转移酶"dUTP缺口末端标记"(dUTP Nick End Labeling)),用于细胞凋亡的示范(其中的标记,在某种程度上,通过片段化DNA来进行)。也可用于治疗"急性淋巴性白血病"诊断之"免疫荧光测定"(immuno-fluorescence)。[4]

免疫组织化学中,抗体TdT酶可用于显示未成熟的T细胞和B细胞以及多能的"造血(Haematopoiesis)干细胞"的存在,其具有抗原,而成熟的淋巴样细胞总是呈"TdT阴性"。而末端转移酶阳性的细胞中发现少量的健康淋巴结扁桃体,急性淋巴细胞白血病的恶性细胞也呈"TdT阳性",而抗体,因此可以被用来作为面板诊断及区别这种疾病的一部分,比如,"初发期的小细胞肿瘤"(small cell tumours of childhood)。[5]

参见

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注释

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  1. ^ Isobe M, Huebner K, Erikson J, Peterson RC, Bollum FJ, Chang LM, Croce CM. Chromosome localization of the gene for human terminal deoxynucleotidyltransferase to region 10q23-q25. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. September 1985, 82 (17): 5836–40. PMC 390648 . PMID 3862101. doi:10.1073/pnas.82.17.5836. 
  2. ^ Yang-Feng TL, Landau NR, Baltimore D, Francke U. The terminal deoxynucleotidyltransferase gene is located on human chromosome 10 (10q23-q24) and on mouse chromosome 19. Cytogenet. Cell Genet. 1986, 43 (3-4): 121–6. PMID 3467897. doi:10.1159/000132309. 
  3. ^ Hardy, Richard. Chapter 7: B Lymphocyte Development and Biology. Paul, William (编). Fundamental Immunology (Book) 6th. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins. 2008: 237–269. ISBN 0-7817-6519-6. 
  4. ^ Faber J, Kantarjian H, Roberts MW, Keating M, Freireich E, Albitar M. Terminal deoxynucleotidyl transferase-negative acute lymphoblastic leukemia. Arch. Pathol. Lab. Med. January 2000, 124 (1): 92–7. PMID 10629138. 
  5. ^ Leong, Anthony S-Y; Cooper, Kumarason; Leong, F Joel W-M. Manual of Diagnostic Cytology 2. Greenwich Medical Media, Ltd. 2003: 413–414. ISBN 1-84110-100-1. 

延伸阅读

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外部链接

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