荧光显微镜是一种使用荧光磷光物质的光学显微镜,或除此之外使用反射吸收用于研究的有机或无机物质的特性。[1][2]“荧光显微镜”是指使用荧光来产生一个图像的任何显微镜,无论是更简单的设置像落射荧光显微镜,或更复杂的设计如共聚焦显微镜,其使用光学切片英语Optical sectioning,以获得分辨率更高的荧光图像。

正立的奥林巴斯BX61荧光显微镜,在物镜上面有荧光滤光块转盘,联接数字相机。
各种生物体的大小尺寸比较,毛发,细胞,染色体,病毒,原子。
蔡司的荧光显微镜物镜

2014年10月8日,诺贝尔化学奖颁给了艾力克·贝齐格威廉·莫尔纳尔斯特凡·赫尔,表扬其发展超高清晰度荧光显微镜(Super-Resolved Fluorescence Microscopy),带领光学显微镜微米级进入纳米级尺度中。[3][4]

原理

编辑
 
荧光显微镜原理

样品被照射特定波长(或波段)的光,其被荧光团英语Fluorophore吸收,导致它们发出更长波长的光(例如和被吸收的光不同的颜色)。通过使用光谱发射滤片,该照明光被从弱得多的发射荧光中分离出来。

近年来在生物学研究中,荧光标签被广泛地使用来标定生物分子,使荧光显微镜变得更加重要。它以水银灯氙气灯英语Xenon arc lamp为光源,搭配具激发滤片英语Excitation filter发散滤片英语Emition filter滤片组的光学仪器。

目前被普遍使用的荧光显微镜属于落射荧光显微镜,是指激发光的来源和观察的位置(接目镜),皆位于样品的同方,通过相同的光路。这些显微镜被广泛应用于生物学,并且是更先进的显微镜设计的基础,例如共聚焦显微镜全内反射荧光显微镜(TIRF)。

光源

编辑

荧光显微镜要求强烈的,近乎单色光的照明,这是一些普遍的光源,比如卤素灯泡不能提供的。四种主要类型的光源的使用,包括氙气灯英语Xenon arc lamp或带有激发滤片(Excitation Filter)的水银灯激光超连续光谱光源,和高功率发光二极管。激光被最广泛地用于更复杂的荧光显微技术,像共聚焦显微镜或全内反射荧光显微镜。而氙气灯英语Xenon arc lamp水银灯,和发光二极管与分色激发滤片通常被用于广角落射荧光显微镜(Epi-Fluorescence Microscopes)。


 
奥林巴斯BX51荧光显微镜及数字图像处理系统
 
自体荧光超高分辨率显微镜记录细胞结构

荧光显微镜图片

编辑

参看

编辑

参考资料

编辑
  1. ^ Spring KR, Davidson MW. Introduction to Fluorescence Microscopy. Nikon MicroscopyU. [2008-09-28]. (原始内容存档于2016-07-03). 
  2. ^ The Fluorescence Microscope. Microscopes—Help Scientists Explore Hidden Worlds. The Nobel Foundation. [2008-09-28]. (原始内容存档于2010-01-09). 
  3. ^ Ritter, Karl; Rising, Malin. 2 Americans, 1 German win chemistry Nobel. AP News. October 8, 2014 [October 8, 2014]. (原始内容存档于2018-10-02). 
  4. ^ Chang, Kenneth. 2 Americans and a German Are Awarded Nobel Prize in Chemistry. New York Times. October 8, 2014 [October 8, 2014]. (原始内容存档于2014-10-09). 

外部链接

编辑