丙酮酸激酶（英語：Pyruvate kinase，EC 2.7.1.40）是糖酵解過程中的一類酶，催化磷酸基團從磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）轉移到ADP的反應，生成一分子丙酮酸和一分子ATP.
丙酮酸激酶所催化的反應為
反應需要鎂離子作為輔因子。
這步反應是有氧狀態下糖酵解途徑的最後一步，生成終產物丙酮酸，但在無氧條件下，丙酮酸會繼續發酵生成乳酸或酒精+二氧化碳。
