在化學中,分光光度法(英語:Spectrophotometry)是材料的反射或透射特性隨波長變化的定量測量[2]。它比一般的電磁光譜法更具體,因為分光光度法處理可見光,近紫外光和近紅外光,但不包括時間分辨光譜英語Time-resolved spectroscopy技術。

檯式的分光光度計
貝克曼(Beckman) IR-1 分光光度計, 1941年
貝克曼DB型號分光光度計 (一個雙光束型號), 1960年
用於圖形行業的手持式分光光度計[1]

概論

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分光光度法是一種工具,取決於對有色化合物吸收多少光,對分子進行定量分析。 分光光度法使用稱為分光光度計的光度計,該光度計可以測量光束強度作為其顏色(波長)的函數。分光光度計的重要特徵是光譜帶寬(它可以透射通過測試樣品的顏色範圍),樣品透射率的百分比,樣品吸收率的對數範圍,有時還包括反射率測量的百分比。

分光光度法通常用於測量溶液,透明或不透明固體(例如拋光玻璃)或氣體的透射率或反射率。

分光光度法的使用涉及多個科學領域,例如物理學材料科學化學生物化學化學工程,和分子生物學[3]。 它們被廣泛用於許多行業,包括半導體,雷射和光學製造,印刷和法醫檢查以及化學物質研究實驗室。 分光光度法通常用於酶活性的測定,蛋白質濃度的測定,酶動力學常數的測定以及配體結合反應的測定。最終,分光光度法能夠根據對照或校準物來確定什麼 通過計算觀察到的波長,目標中存在的物質以及確切的數量。

將含有各種波長的混合光分散為各種單色光,使每種單色光依次通過某一濃度溶液,測定溶液對每種光波的吸光度,繪出吸收光譜。由於物質的吸收光區域和強度與結構密切相關,根據特有的吸收光譜可作分子結構分析。此外,利用特定波長的單色光分別透過標準溶液與待測溶液,比較其吸光度,可作定量分析

分光技術中包括了分光光度計(英語:spectrophotometer)是一種分析強度物理實驗室設備,可以量測不同波長強度,分析波長強度的關係。亦可以量測特定物質的吸光度透光度。目前有許多種分光儀,如指針型、數字型。

紫外-可見分光光度法

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紫外-可見分光光度法(Ultraviolet–visible spectroscopy,縮寫:UV-Vis),又稱「紫外-可見分子吸收光譜法」,是以紫外線-可見光區域電磁波連續光譜作為光源照射樣品,研究物質分子對光吸收的相對強度的方法。通過分子紫外-可見分子吸收光譜法的分析可以進行定性分析,並可依據朗伯-比爾定律進行定量分析

參見

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參考資料

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  1. ^ ISO 12647-2: Graphic technology — Process control for the production of halftone colour separations, proof and production prints — Part 2: Offset lithographic processes. Geneva: International Organization for Standardization. 2013: 13 (英語). 
  2. ^ Allen, DW; Cooksey, C; Tsai, BK. Spectrophotometry. NIST. Nov 13, 2009 [Dec 23, 2018]. (原始內容存檔於2020-12-13). 
  3. ^ Rendina G. Experimental Methods in Modern Biochemistry . Philadelphia, PA: W. B. Saunders Company. 1976: 46-55. ISBN 0721675506. OCLC 147990.