定點突變

定點突變（Site-directed mutagenesis），經由設計好的寡核苷酸，在任何一個基因片段上進行隨意或設計好的突變，也就是說，這種突變是預先設定好的，所以也有人將它稱為「反遺傳法」。定點突變由加拿大生化學家麥可·史密斯發明，他與PCR發明者凱利·穆利斯在1993年共同獲得諾貝爾化學獎。

根據生物學，基因會發生突變，突變可以自發也可以誘發。在定點突變法之前，突變株的產生必須經由自然界或用化學等方法讓基因突變，這屬於隨機突變。而突變株必須在生物體上有所改變，才能確定有突變發生。突變位置必須利用分生或化學方法來確定。而定點突變法可經由設計好的寡核苷酸，在任何一個基因片段上進行隨意或設計好的突變，也就是說，這種突變是預先設定好的。

基本原理

定點突變的基本流程需要合成一個短的 DNA 引子。其包含了目標突變，並且與突變位點附近的模板 DNA 互補以與目的基因的 DNA 雜交。突變可以是一個鹼基的改變（點突變），多個鹼基的改變，增加或者刪除。這個引物接著被一個 DNA 聚合酶延展，拷貝剩下的基因。拷貝後的基因包含了突變位點，並以載體的形式引入宿主細胞，並被複製。最後，突變將通過 DNA 測序以確保包含了目標突變。

原始的單引物延展法很低效，突變產量低。產物包含了原有的非突變模板以及突變鏈，突變及非突變後代混合在一起。此外，模板 DNA 經過甲基化，而突變鏈未經甲基化，由於偏愛甲基化模板 DNA 的錯配修復系統的存在，導致突變數目進一步下降。因此，人們開發了許多新方法來提高突變效率。

方法

1.以有配對錯誤的單股DNA分子作為引物，此引物包含想要突變的核苷酸，與載體進行退火後，轉化導入細胞內。 2.DNA雙股使用DNA 聚合酶來延長，宿主會產生兩種質體，進行克隆轉譯後即得到突變一個胺基酸的蛋白質。

應用

利用分子選殖的方法，可以改變基因上的特定鹼基，送入載體之後，可在宿主中表現。亦可知道特定胺基酸的改變對蛋白質和酵素的影響。