溴化乙锭
溴化乙锭（英语：Ethidium bromide或homidium bromide[1]、chloride salt homidium chloride[2][3]），常缩写作EtBr（与溴乙烷的缩写相同；为避免混淆，一些实验室使用缩写EthBr来表示溴化乙锭），是一种嵌入剂（英语：intercalating agent），通常在分子生物学实验室中用作琼脂糖凝胶电泳（英语：Agarose gel electrophoresis）等技术的萤光标签（英语：Fluorescent tag）（核酸染色剂）。当暴露在紫外线下时，它会发出橙色萤光，与DNA结合后强度增强近20倍。Homidium自1950年代以来一直在兽医领域广泛用于治疗牛的锥虫病（英语：Trypanosomiasis）。[4] 抗生素抗药性的高发生率使得这种治疗在某些地区不切实际，而在这些地区使用相关的氯化氮氨菲啶（英语：Isometamidium chloride）。尽管它被誉为诱变剂，但测试表明它在没有代谢活化的情况下具有较低的诱变性。[5][6]
| 溴化乙锭 | |
|---|---|
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| IUPAC名 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide | |
| 别名 | EtBr |
| 识别 | |
| CAS号 | 1239-45-8 
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| PubChem | 14710 |
| ChemSpider | 14034 |
| SMILES |
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| InChI |
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| InChIKey | ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYAD |
| EINECS | 214-984-6 |
| ChEBI | 4883 |
| RTECS | SF7950000 |
| KEGG | C11161 |
| 性质 | |
| 化学式 | C21H20BrN3 |
| 摩尔质量 | 394.294 g·mol⁻¹ |
| 外观 | 紫红色固体 |
| 熔点 | 260 - 262 °C |
| 溶解性（水） | ~ 40 g/l |
| 药理学 | |
| ATCvet代码 | QP51AX06（QP51） |
| 危险性 | |
| 警示术语 | R：R25 R36/37/38 R46 |
| 安全术语 | S：S22 S24/25 S26 S36/37/39 S45 S53 |
| NFPA 704 |
 1
3
0
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| 闪点 | > 100 °C |
| 若非注明，所有数据均出自标准状态（25 ℃，100 kPa）下。 | |
使用
编辑电泳后的凝胶染色，用水将储备液样本稀释至0.5μg/ml，并将凝胶培养15至30分钟。通常不需要脱色，但如果需要降低背景，可以在水中脱色15分钟。然后可在紫外线灯箱（波长254nm）上检测DNA带（英语：DNA bands）。溴化乙锭也可以0.5 μg/ml浓度掺入凝胶和电泳缓冲液中，并在电泳后立即可视化。[7]
毒性
编辑溴化乙锭分子结构扁平，同时分子中还含有季铵阳离子结构，使得溴化乙锭能插入DNA碱基对之间并使相邻碱基对间距离增大，从而引起DNA框架结构的变动，并致使三联密码转录和翻译时发生较多遗传讯息的改变，最终诱发移码突变。故溴化乙锭是一种强的诱变剂，可致癌或致畸。[8]
大学生物实验经常会使用此染料，操作时必须要佩戴手套并且尽可能的避免任何接触。
含有溴化乙锭的废液应当经过处理才能排放[9]，否则会对生物体造成不可逆的伤害。
溴化乙锭有更安全，但也更昂贵的替代品（如SYBR Green I）。
参考文献
编辑- ^ PubChem. Ethidium bromide. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov. [2024-08-12] （英语）.
- ^ Kinabo, L. D. Pharmacology of existing drugs for animal trypanosomiasis. Acta Tropica. 1993-09, 54 (3-4). ISSN 0001-706X. PMID 7902656. doi:10.1016/0001-706x(93)90091-o.
- ^ PubChem. 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium chloride. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov. [2024-08-12] （英语）.
- ^ Stevenson, P.; Sones, K. R.; Gicheru, M. M.; Mwangi, E. K. Comparison of isometamidium chloride and homidium bromide as prophylactic drugs for trypanosomiasis in cattle at Nguruman, Kenya. Acta Tropica. 1995-05, 59 (2). ISSN 0001-706X. PMID 7676909. doi:10.1016/0001-706x(94)00080-k.
- ^ Lowe, Derek. The Myth of Ethidium Bromide. In the Pipeline. 2016-04-18 [2019-02-28] （美国英语）.
- ^ Ethidium Bromide: Swap or Not | UC Santa Barbara | Sustainability. www.sustainability.ucsb.edu. [2024-08-12].
- ^ Ethidium bromide = 95.0 1239-45-8. Sigma-Aldrich.
- ^ 张景海. 药学分子生物学（第八版）. 北京: 人民卫生出版社. 2016-2: 174–179. ISBN 978-7-117-22373-7 （中文）.
- ^ 金属卟啉催化的致癌、致突变剂无害化处理技术研究. [2020-11-02]. （原始内容存档于2019-06-07）.
外部链接
编辑- Borst P. Ethidium DNA agarose gel electrophoresis: how it started. IUBMB Life. 2005 Nov;57(11):745-7. PMID 16511967
- PMID 68004996, PubMed's MeSH term: Ethidium