溴化乙錠
溴化乙錠(英語:Ethidium bromide或homidium bromide[1]、chloride salt homidium chloride[2][3]),常縮寫作EtBr(與溴乙烷的縮寫相同;為避免混淆,一些實驗室使用縮寫EthBr來表示溴化乙錠),是一種嵌入劑(英語:intercalating agent),通常在分子生物學實驗室中用作瓊脂糖凝膠電泳(英語:Agarose gel electrophoresis)等技術的螢光標籤(英語:Fluorescent tag)(核酸染色劑)。當暴露在紫外線下時,它會發出橙色螢光,與DNA結合後強度增強近20倍。Homidium自1950年代以來一直在獸醫領域廣泛用於治療牛的錐蟲病(英語:Trypanosomiasis)。[4] 抗生素抗藥性的高發生率使得這種治療在某些地區不切實際,而在這些地區使用相關的氯化氮氨菲啶(英語:Isometamidium chloride)。儘管它被譽為誘變劑,但測試表明它在沒有代謝活化的情況下具有較低的誘變性。[5][6]
溴化乙錠 | |
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IUPAC名 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium bromide | |
別名 | EtBr |
識別 | |
CAS號 | 1239-45-8 ![]() |
PubChem | 14710 |
ChemSpider | 14034 |
SMILES |
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InChI |
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InChIKey | ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYAD |
EINECS | 214-984-6 |
ChEBI | 4883 |
RTECS | SF7950000 |
KEGG | C11161 |
性質 | |
化學式 | C21H20BrN3 |
摩爾質量 | 394.294 g·mol⁻¹ |
外觀 | 紫紅色固體 |
熔點 | 260 - 262 °C |
溶解性(水) | ~ 40 g/l |
藥理學 | |
ATCvet代碼 | QP51AX06(QP51) |
危險性 | |
警示術語 | R:R25 R36/37/38 R46 |
安全術語 | S:S22 S24/25 S26 S36/37/39 S45 S53 |
NFPA 704 | |
閃點 | > 100 °C |
若非註明,所有數據均出自標準狀態(25 ℃,100 kPa)下。 |
使用
編輯電泳後的凝膠染色,用水將儲備液樣本稀釋至0.5μg/ml,並將凝膠培養15至30分鐘。通常不需要脫色,但如果需要降低背景,可以在水中脫色15分鐘。然後可在紫外線燈箱(波長254nm)上檢測DNA帶(英語:DNA bands)。溴化乙錠也可以0.5 μg/ml濃度摻入凝膠和電泳緩衝液中,並在電泳後立即可視化。[7]
毒性
編輯溴化乙錠分子結構扁平,同時分子中還含有季銨陽離子結構,使得溴化乙錠能插入DNA鹼基對之間並使相鄰鹼基對間距離增大,從而引起DNA框架結構的變動,並致使三聯密碼轉錄和翻譯時發生較多遺傳訊息的改變,最終誘發移碼突變。故溴化乙錠是一種強的誘變劑,可致癌或致畸。[8]
大學生物實驗經常會使用此染料,操作時必須要佩戴手套並且儘可能的避免任何接觸。
含有溴化乙錠的廢液應當經過處理才能排放[9],否則會對生物體造成不可逆的傷害。
溴化乙錠有更安全,但也更昂貴的替代品(如SYBR Green I)。
參考文獻
編輯- ^ PubChem. Ethidium bromide. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov. [2024-08-12] (英語).
- ^ Kinabo, L. D. Pharmacology of existing drugs for animal trypanosomiasis. Acta Tropica. 1993-09, 54 (3-4). ISSN 0001-706X. PMID 7902656. doi:10.1016/0001-706x(93)90091-o.
- ^ PubChem. 3,8-Diamino-5-ethyl-6-phenylphenanthridinium chloride. pubchem.ncbi.nlm.nih.gov. [2024-08-12] (英語).
- ^ Stevenson, P.; Sones, K. R.; Gicheru, M. M.; Mwangi, E. K. Comparison of isometamidium chloride and homidium bromide as prophylactic drugs for trypanosomiasis in cattle at Nguruman, Kenya. Acta Tropica. 1995-05, 59 (2). ISSN 0001-706X. PMID 7676909. doi:10.1016/0001-706x(94)00080-k.
- ^ Lowe, Derek. The Myth of Ethidium Bromide. In the Pipeline. 2016-04-18 [2019-02-28] (美國英語).
- ^ Ethidium Bromide: Swap or Not | UC Santa Barbara | Sustainability. www.sustainability.ucsb.edu. [2024-08-12].
- ^ Ethidium bromide = 95.0 1239-45-8. Sigma-Aldrich.
- ^ 張景海. 药学分子生物学(第八版). 北京: 人民衛生出版社. 2016-2: 174–179. ISBN 978-7-117-22373-7 (中文).
- ^ 金属卟啉催化的致癌、致突变剂无害化处理技术研究. [2020-11-02]. (原始內容存檔於2019-06-07).
外部連結
編輯- Borst P. Ethidium DNA agarose gel electrophoresis: how it started. IUBMB Life. 2005 Nov;57(11):745-7. PMID 16511967
- PMID 68004996, PubMed's MeSH term: Ethidium